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油镜的原理是什么意思(mpo染色的原理及意义)

大家好,今天小编来为大家解答以下的问题,关于油镜的原理是什么意思,mpo染色的原理及意义这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

一、微生物实验简单染色法的目的是什么

目的:破坏细胞膜的选择透过性,再使用染色剂,将生物组织浸入染色剂内。

原理:使组织细胞的某一部分染上与其他部分不同的颜色或深度不同的颜色,产生不同的折射率,以便观察。

最常用的是苏木精和伊红染色法;按照现代的染色理论的观点,染料之所以能够上染纤维,并在纤维织物上具有一定牢度,是因为染料分子与纤维分子之间存在着各种引力的缘故。

二、mpo染色的原理及意义

过氧化物酶(peroxidase,POX)是存在于生物体内的一种酶,在血细胞中主要为髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO),主要存在于粒细胞和单核细胞中。其染色原理是利用粒细胞、单核细胞内的POX,能使过氧化氢(H2O2)分解,释放出新生态氧,氧化四甲基联苯胺,生成四甲基联苯胺蓝,再与亚硝基铁氰化钠结合,形成稳定的蓝色颗粒,沉淀于细胞质内。

【试剂】

1.0.1%四甲基联苯胺(TMB)乙醇溶液0.1gTMB溶于100ml88%乙醇中,储于棕色瓶中,4℃保存。

2.亚硝基铁氰化钠饱和溶液(360g/L)少量蒸馏水中加入亚硝基铁氰化钠晶体,搅拌直至不再溶解为止,储于棕色瓶中,4℃保存。

3.1%H2O2溶液(新鲜配制)30%H2O21ml加至蒸馏水至29ml。

4.稀H2O2溶液1%H2O21滴加蒸馏水10ml,临用前配制。

5.瑞氏染液。

【操作】

1.取0.1%TMB乙醇溶液1ml,加亚硝基铁氰化钠饱和溶液10μl,在临用前配制。

2.新鲜干燥血片或骨髓片,加0.1%TMB-亚硝基铁氰化钠饱和溶液的混合试剂0.5ml,使布满整张涂片,放置1min。

3.加稀H2O2溶液0.7ml,用洗耳球吹匀,染色5~10min,水洗,待干。

4.用瑞氏染液复染15~30min,水洗,待干,用油镜镜检。

【注意事项】

1.血片或骨髓片应新鲜,立即固定,才能保持酶的活性。

2.TMB配制在85%~88%乙醇溶液中染色效果较好,勿用95%乙醇,否则使显色反应减弱或消失。

3.H2O2溶液需新鲜配制,其浓度过高可抑制酶的活性。粒细胞中若看不见阳性颗粒,表示H2O2浓度太高。H2O2加于血片上若不产生气泡,则表示失效。

4.在涂片上两液混匀时,动作宜轻,以免将阳性颗粒吹散到阴性细胞上。

5.POX的染色方法有复方联苯胺法、二氨基联苯胺法和四甲基联苯胺法等,四甲基联苯胺法是临床上常用的POX染色方法。

【结果】

1.结果判断在胞质中出现蓝色或蓝黑色颗粒为阳性反应(复染者呈蓝黑色)。阳性程度判断标准如下。(www.guayunfan.com)

阴性(-):胞质中无蓝色或蓝黑色颗粒。

弱阳性(+):胞质中的蓝色或蓝黑色颗粒,量少且细小。

阳性(++):胞质中的蓝色或蓝黑色颗粒量多,但粗细不一。

强阳性(++

三、兰氏染色的原理和步骤

革兰氏染色的步骤和原理如下:步骤:

1、首先在载玻片上滴一小滴蒸馏水,用灼烧过的接种针挑取少量细菌,置载玻片的水滴中与水混合并涂抹开,注意涂抹要均匀平坦,涂抹后直径约为1cm的薄层。

2、固定。将载玻片在火焰上方固定。

3、染色。加路哥式碘液大概一滴,作用1min后用水冲洗,注意流水不要直接往薄层上冲,用过滤纸吸干。

4、脱色。用95%乙醇脱色,一般脱色时间大概为30s。

5、观察。干燥后,用油镜镜检观察,并做好记录。原理:染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰染色在医学上的重要意义:1、鉴别细菌:用革兰染色法可将所有细菌分成革兰阳性菌及革兰阴性菌两大类,便于初步识别细菌。2、选择药物:临床上可很据病原菌的革兰染色性,选择有效的抗生素用于治疗。3、与致病性有关:有些革兰阳性菌能产生外毒素,而革兰阴性菌则主要具有内毒素,两者致病作用不同。

好了,关于油镜的原理是什么意思和mpo染色的原理及意义的问题到这里结束啦,希望可以解决您的问题哈!

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