老铁们,大家好,相信还有很多朋友对于为什么芽孢染色要加热和关于芽孢染色有几个问题的相关问题不太懂,没关系,今天就由我来为大家分享分享为什么芽孢染色要加热以及关于芽孢染色有几个问题的问题,文章篇幅可能偏长,希望可以帮助到大家,下面一起来看看吧!
本文目录
芽孢染色法详细步骤
芽孢染色法是一种用于显示细菌芽孢的染色技术,其步骤如下:
涂片:将待检菌落涂在洁净的载玻片上,用火焰固定。
染色:滴加数滴结晶紫染色液于涂片上,用木夹夹住载玻片在微火上加热至染液冒蒸汽时计时2分钟,然后自然冷却。
冲洗:用滤纸吸去染液,用缓冲液冲洗载玻片2次,然后进行脱色。
脱色:用吸水纸吸去载玻片上的缓冲液,滴加95%乙醇脱色,用木夹夹住载玻片在微火上加热至乙醇冒蒸汽时计时30秒,然后自然冷却。
冲洗:用滤纸吸去脱色液,用缓冲液冲洗载玻片2次,然后进行复染。
复染:用吸水纸吸去载玻片上的缓冲液,滴加蕃红染色液,用木夹夹住载玻片在微火上加热至染色液冒蒸汽时计时2分钟,然后自然冷却。
冲洗:用滤纸吸去染液,用缓冲液冲洗载玻片2次,然后用吸水纸吸干剩余的液体。
镜检:将染色好的载玻片用显微镜观察,可见到染成深紫色的芽孢和染成红色的菌体。
需要注意的是,在每个步骤之间都需要进行充分的冲洗,以确保染色结果准确。同时,加热时要注意火候,不要煮沸或烤干染液。
芽孢杆菌计数培养基怎么显色
蜡样芽孢杆菌显色培养基(ChromogenicBacillusCereusAgar)
用途:
用于食品样本中蜡样芽孢杆菌的快速分离和鉴定。
原理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂;琼脂是培养基的凝固剂;混合色素与蜡样芽孢杆菌酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上蜡样芽孢杆菌产生绿~蓝绿色的菌落。
配方(每升):
蛋白胨15g
酵母膏粉4g
磷酸氢二钠2.52g
磷酸二氢钾0.28g
琼脂15g
混合色素3.25g
最终pH7.2±0.2
使用方法:
1、取瓶内干粉40克,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃15min高压灭菌,冷至50℃,每瓶添加剂(SR0210)中加入1ml无菌水,使之完全溶解,然后加入100毫升培养基中,混匀,倾注灭菌平皿。
2、用无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液配制10-1~10-5的样本稀释液按GB/T4789.2测定。
3、取各稀释液0.1ml接种至蜡样芽孢杆菌显色琼脂平板上涂布或划线。
4、37℃培养24小时,选取适当菌落数的平板进行计数。
5、通过验证试验进一步确认假定性蜡样芽孢杆菌,如氧化酶、革兰氏染色等。
6、报告每克(毫升)食品样本中蜡样芽孢杆菌的数目。
关于芽孢染色有几个问题
1、为什么染色需要加热?
整个生物界中抗逆性最强的生命体,是否能消灭芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标,只有在加热的过程芽孢的渗透性发生了变化,染液才能渗透进入芽孢,所以芽孢染色需要加热2、如果在制片中仅看到游离芽胞,而很少看到芽胞囊和营养细胞,为什么?
如果只看到芽孢,可能是:
(1).菌种培养的环境太恶劣了,营养体几乎都快变成芽孢了。
(2).可能是给芽孢染色用水时没洗干净,细胞还是孔雀绿的色彩。
(3).复燃出现问题了,可能是复燃时间不够,没染上,或是水洗的太厉害,把染液都冲走了。希望可以帮上你,
酵母菌染色的方法
酵母菌染色
1.
标记:取一洁净载玻片,在玻片透明区正中央画一直径约1cm的涂片区,反扣玻片,用另一面涂片。
2.
涂片:将棉签放入酵母菌稀释液中浸湿后在杯壁上挤去多余的液体后,直接用棉签在涂片区涂片。
3.
干燥:方法同革兰染色。
4.
直接镜检:用高倍镜观察镜下形态。
为什么芽孢染色要加热和关于芽孢染色有几个问题的问题分享结束啦,以上的文章解决了您的问题吗?欢迎您下次再来哦!