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请教油红O给细胞染色的详细步骤(甲基蓝染色法)

大家好,今天小编来为大家解答请教油红O给细胞染色的详细步骤这个问题,甲基蓝染色法很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

本文目录

  1. psa染色技术
  2. 石蜡去染色的方法
  3. 甲基蓝染色法
  4. 活体染色的实验步骤

psa染色技术

PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。

原理

PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。

原理:过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。

石蜡去染色的方法

1、首先取下组织,投入预先配好的固定液福尔马林中,使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。

2、固定成功后,修剪,用水洗去多余固定液,然后放入不同浓度的酒精脱水,一般用由低浓度到高浓度酒精依次浸泡,逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精,又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出组织块的中酒精。

3、将已经已经融化好的石蜡倒入脱水透明后的组织中,放入溶蜡箱中保温一段时间,待石蜡液完全渗入组织块中,在用石蜡液包埋(石蜡液的体积最好大于组织体积的10倍),冷却凝固成块,以便实验中切片。

4、切片、展片、烤片:将包埋好的蜡块固定于切片机上,切成薄片,一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折,要放到加热的水中烫平,再贴到载玻片上,放45℃恒温箱中烘干。

5、染色:脱蜡——水化——染色——脱水——透明——封片——观察

甲基蓝染色法

用亚甲基蓝溶液染色后,被染为深蓝色的部分是(细胞核)亚甲基蓝可以结合核酸,使细胞核呈蓝色。台盼蓝能使死细胞着色机理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。

活体染色的实验步骤

1、活细胞的检测一:台酚蓝排除法取一滴细胞悬液,与一滴2%台酚蓝溶液混合,放盖玻片,静置3分钟,显微镜下观察染色情况。活细胞不着色,死细胞呈蓝色。计算活细胞的百分比。

2、活细胞的检测二:中性红法1)在小离心管中,用Hanks液对1%中性红水溶液作10倍稀释,1500rpm离心7分钟,取上清液置另一干净的离心管中作为染色液。

2)将细胞悬液与染液4:1混合,混匀后加盖玻片静置15-20分钟。

3)显微镜观察染色情况。死细胞不着色,活细胞可吸收中性红溶液而呈红色。

请教油红O给细胞染色的详细步骤和甲基蓝染色法的问题分享结束啦,以上的文章解决了您的问题吗?欢迎您下次再来哦!

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