USB 2.0和USB 3.0是U盘的两种接口规格，它们之间存在显著的区别。它们的传输速度有很大的不同。USB 2.0的理论最高传输速度是每秒480兆位数据，而USB 3.0的理论最高速度则高达每秒5Gbps，这意味着USB 3.0的速度远远超过USB 2.0，能够让文件传输更快，减少等待时间。

除了传输速度的差异外，USB 2.0和USB 3.0在外观设计上也有显著不同。USB 3.0通常采用蓝色接口，与USB 2.0的黑色或白色接口形成鲜明对比，这使得在插入电脑时更容易区分。它们的针脚设计也有所不同，USB 3.0为了支持更高的传输速度，采用了9针脚设计，而USB 2.0则是4针脚设计。

在实际应用中，如果使用的是USB 2.0版本的U盘插入USB 3.0接口，其传输速度只能达到USB 2.0的速度；反之，如果是USB 3.0版本的U盘插入USB 2.0接口，也同样只能达到USB 2.0的传输速度。这是因为电脑和U盘的接口版本需要相匹配，才能达到理论上的最高传输速度。USB 3.0是向下兼容的，这意味着两种版本的U盘都可以在计算机上正常使用，只是无法享受到更高的传输速度。

值得一提的是，USB 3.0支持多种操作系统，包括Windows、Mac OS X以及Linux内核的各版本系统。而USB 2.0也支持多种操作系统，包括Microsoft的多个版本操作系统以及Linux系统。这些参考信息主要来源于百度百科。USB 3.0相较于USB 2.0具有更快的传输速度、更好的外观设计和更广泛的系统支持等优点。